耐镉浮萍筛选、鉴定及其对镉的富集效果

郑萌盟, 谭艾娟, 吕世明, 冯丹, 杨潇, 罗菲, 杨贵利. 耐镉浮萍筛选、鉴定及其对镉的富集效果[J]. 环境工程学报, 2022, 16(2): 471-480. doi: 10.12030/j.cjee.202110072
引用本文: 郑萌盟, 谭艾娟, 吕世明, 冯丹, 杨潇, 罗菲, 杨贵利. 耐镉浮萍筛选、鉴定及其对镉的富集效果[J]. 环境工程学报, 2022, 16(2): 471-480. doi: 10.12030/j.cjee.202110072
ZHENG Mengmeng, TAN Aijuan, LV Shiming, FENG Dan, YANG Xiao, LUO Fei, YANG Guili. Screening, identification and enrichment effects of cadmium-tolerant duckweeds[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(2): 471-480. doi: 10.12030/j.cjee.202110072
Citation: ZHENG Mengmeng, TAN Aijuan, LV Shiming, FENG Dan, YANG Xiao, LUO Fei, YANG Guili. Screening, identification and enrichment effects of cadmium-tolerant duckweeds[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2022, 16(2): 471-480. doi: 10.12030/j.cjee.202110072

耐镉浮萍筛选、鉴定及其对镉的富集效果

    作者简介: 郑萌盟(1998—),女,硕士研究生,zmm18073198235@163.com
    通讯作者: 杨贵利(1991—),女,博士,副教授,glyang3@gzu.edu.cn
  • 基金项目:
    国家自然科学基金青年资助项目(32001203);国家自然科学基金地区科学基金资助项目(31760749);贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2018]2276);贵州大学人才引进项目(贵大人基合字[2019]60)
  • 中图分类号: X703.1

Screening, identification and enrichment effects of cadmium-tolerant duckweeds

    Corresponding author: YANG Guili, glyang3@gzu.edu.cn
  • 摘要: 近年来,水体镉污染日益严峻,筛选超富集植物用于其治理具有重要意义。本研究以90个浮萍株系为实验材料,采用30 mg·L−1 的镉处理7 d,获得7个镉耐受优势株系。通过Blast比对和构建系统发育树鉴定该7个浮萍株系的种属,确定为Spirodela polyrhiza、Lemna japonica、Lemna minorLandoltia punctata。通过低质量浓度(0.5 mg·L−1)和高质量浓度(10 mg·L−1)镉处理7 d,进一步比较和研究了7个优势株系对镉的富集效果。结果表明,低浓度镉处理后,5个株系的镉富集量超过100 mg·kg−1;高浓度镉处理后,7个浮萍株系的镉富集量超过1 200 mg·kg−1,生物富集系数大于120,对水体中镉的去除率高于70%。其中,4号株系(L. japonica)为本次筛选出的最佳株系,其镉富集量、生物富集系数和对水体中镉的去除率分别达到2 834.30 mg·kg−1、283.43和82.50%。
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  • 图 1  初筛镉处理前后对比

    Figure 1.  Comparison of duckweed species before and after Cd treatment in the preliminary screening process

    图 2  7个浮萍株系atpF-atpH序列和rpS16 序列 PCR扩增的凝胶电泳图

    Figure 2.  Gel electrophoresis of 7 duckweed strains atpF-atpH and rpS16 sequences amplified by PCR

    图 3  7个浮萍株系的系统发育树

    Figure 3.  Phylogenetic trees of 7 duckweed strains

    图 4  7个浮萍株系在不同镉浓度处理后的生长速率

    Figure 4.  The growth rates of 7 duckweed strains under different Cd treatments

    图 5  7个浮萍株系在不同镉浓度处理后叶绿素含量的变化

    Figure 5.  Changes in chlorophyll content of 7 duckweed strains under different Cd treatments

    图 6  7个浮萍株系在不同镉浓度处理后镉富集量和生物富集系数

    Figure 6.  The cadmium concentration and bioconcentration factor of 7 duckweed strains under different Cd treatments

    图 7  7个浮萍株系在不同镉浓度处理后对水体中镉的去除率

    Figure 7.  Cd removal rates of 7 duckweed strains under different cadmium treatments

    表 1  浮萍株系编号和采集信息

    Table 1.  Duckweed species number and collection place

    株系编号采集地经纬度
    1 北京市昌平区 E116°42'47'' N40°10'92''
    2 贵阳市花溪区 E106°39'23'' N26°26'59''
    3 贵阳市花溪区 E106°39'57'' N26°26'49''
    4 北京市昌平区 E116°42'47" N40°10'92"
    5 重庆市大足区 E105°51′1″ N29°27′48″
    6 重庆市大足区 E105°45′28″ N29°27′57″
    7 重庆市大足区 E105°45′23″ N29°27′55″
    株系编号采集地经纬度
    1 北京市昌平区 E116°42'47'' N40°10'92''
    2 贵阳市花溪区 E106°39'23'' N26°26'59''
    3 贵阳市花溪区 E106°39'57'' N26°26'49''
    4 北京市昌平区 E116°42'47" N40°10'92"
    5 重庆市大足区 E105°51′1″ N29°27′48″
    6 重庆市大足区 E105°45′28″ N29°27′57″
    7 重庆市大足区 E105°45′23″ N29°27′55″
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    表 2  7个浮萍Blast种属鉴定结果

    Table 2.  Species identification of 7 duckweed strains by Blast

    株系编号atpF-atpH比对序列atpF-atpH序列相似性/%rpS16比对序列rpS16 序列相似性/%种属
    1MN41933599.28KJ50328599.69%Spirodela polyrhiza
    2KX21288899.00KX21289199.38%Lemna minor
    3KX21288898.49KX21289199.69%Lemna minor
    4KJ92174799.70EU56888794.80%Lemna japonica
    5KJ92174799.11EU56888794.80%Lemna japonica
    6KJ63055599.30KJ50332799.70%Landoltia punctata
    7KJ63055597.25KJ50332799.60%Landoltia punctata
    株系编号atpF-atpH比对序列atpF-atpH序列相似性/%rpS16比对序列rpS16 序列相似性/%种属
    1MN41933599.28KJ50328599.69%Spirodela polyrhiza
    2KX21288899.00KX21289199.38%Lemna minor
    3KX21288898.49KX21289199.69%Lemna minor
    4KJ92174799.70EU56888794.80%Lemna japonica
    5KJ92174799.11EU56888794.80%Lemna japonica
    6KJ63055599.30KJ50332799.70%Landoltia punctata
    7KJ63055597.25KJ50332799.60%Landoltia punctata
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-10-15
  • 录用日期:  2021-12-20
  • 刊出日期:  2022-02-10

耐镉浮萍筛选、鉴定及其对镉的富集效果

    通讯作者: 杨贵利(1991—),女,博士,副教授,glyang3@gzu.edu.cn
    作者简介: 郑萌盟(1998—),女,硕士研究生,zmm18073198235@163.com
  • 1. 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院,山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室,贵州省农业生物工程重点实验室,贵阳 550025
  • 2. 贵州大学动物科学学院,贵阳 550025
  • 3. 中国科学院地球化学研究所环境地球化学国家重点实验室,贵阳 550025
基金项目:
国家自然科学基金青年资助项目(32001203);国家自然科学基金地区科学基金资助项目(31760749);贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2018]2276);贵州大学人才引进项目(贵大人基合字[2019]60)

摘要: 近年来,水体镉污染日益严峻,筛选超富集植物用于其治理具有重要意义。本研究以90个浮萍株系为实验材料,采用30 mg·L−1 的镉处理7 d,获得7个镉耐受优势株系。通过Blast比对和构建系统发育树鉴定该7个浮萍株系的种属,确定为Spirodela polyrhiza、Lemna japonica、Lemna minorLandoltia punctata。通过低质量浓度(0.5 mg·L−1)和高质量浓度(10 mg·L−1)镉处理7 d,进一步比较和研究了7个优势株系对镉的富集效果。结果表明,低浓度镉处理后,5个株系的镉富集量超过100 mg·kg−1;高浓度镉处理后,7个浮萍株系的镉富集量超过1 200 mg·kg−1,生物富集系数大于120,对水体中镉的去除率高于70%。其中,4号株系(L. japonica)为本次筛选出的最佳株系,其镉富集量、生物富集系数和对水体中镉的去除率分别达到2 834.30 mg·kg−1、283.43和82.50%。

English Abstract

  • 近年来,随着工业化进程的不断加快,镉(Cd)、汞(Hg)和铅(Pb)等重金属的污染问题愈加严重[1]。其中,水体镉污染尤为严峻,我国部分江河湖泊受到不同程度的镉污染[2]。例如,龙江河发生的严重镉污染事件,水体的镉含量超标80倍[3]。安宁河镉含量最高曾达0.6 mg·L−1,远远超过国家地表水Ⅴ类标准(GB 3838-2002)[4]。海河总镉含量也曾超过地表水Ⅱ类标准的16.7%~83.9%[5]。水体中的镉不仅能直接通过饮用水进入人体,还会通过富集于水生动植物中再经食物链累积,最终通过饮食被摄入人体。进入人体的镉会沉积在骨骼、皮肤和肾脏等组织中,进而造成组织器官的损伤甚至癌变,严重影响人体健康[6-9]。因此,水体镉污染的治理至关重要。

    去除水体重金属的方法常见的有物理方法、化学方法和生物方法[10]。与物理、化学方法相比,生物修复方法具有低成本、无二次污染、高效率等优点[11]。其中,植物修复技术通过超富集植物从污染水体中摄取重金属并将其富集在体内,从而实现对污染水体的修复[12],具有巨大发展潜力。决定植物修复技术修复重金属污染效果和应用价值的最关键之处,是找到合适的重金属超富集植物[13]。通常,重金属超富集植物是指富集后重金属含量能超过1 000 mg·kg−1(干质量)的植物,而重金属含量仅需超过100 mg·kg−1(干质量)则可被定义为镉超富集植物[14]

    浮萍,由于生长速度快、污染物去除效率高,是一种理想的污染水体修复材料和研究污染物胁迫理论的模式植物[15]。浮萍共有5属36个种,生长速度快,其生物量每16~24 h增加1倍,有利于前期的育种扩繁[16-17]。浮萍是形态最简单的开花水生植物,仅有叶状体和根,可以避免离子的长距离运输,离子转运效率极高[18]。浮萍能在温度为10~40 ℃、pH为5.0~9.0条件下生长,环境适应能力强[19-20]。浮萍对Cu、Zn、Cd、Pb等重金属都有一定富集和耐受能力[21-22],并在采集收获、加工应用等方面表现出较大优势,已受到广泛关注[23]

    然而,有关浮萍在重金属耐受和富集方面的研究目前都还主要集中在少数品种上,缺乏系统的研究[21,24-29]。多根紫萍(Spirodela polyrrhiza)对镉非常敏感,其相对生长速率和光合色素含量在1 μmol·L−1的镉胁迫7 d后显著降低,被认为是一种具有开发应用价值的重金属指示物[24-25]。而少根紫萍(Landoltia punctata)在3 mg·L−1 的镉处理10 d后,富集系数和对水体中镉的去除率分别可达到为770和72.43%,具有明显的高富集优势[26]。由此可见,由于基因型不同,不同种属的浮萍对重金属镉的富集效果差异较大。因此,比较不同浮萍种属间镉富集效果的差异,筛选最适合的浮萍品种,对进一步应用植物修复技术具有现实意义。

    本研究为筛选出最适于治理水体镉污染的浮萍品种,通过30 mg·L−1 镉处理7 d初筛90株浮萍株系,以叶片颜色变化为判断标准,获得7株优势浮萍株系。对该7株浮萍株系进行了种属鉴定和进一步复筛,在0.5 mg·L−1(低质量浓度)和10 mg·L−1(高质量浓度)镉浓度下处理7 d,比较了7株浮萍株系的生长速率、叶绿素含量、对镉的富集效果和去除率,以期筛选出对镉富集效果最佳的浮萍品种,为今后利用最佳浮萍品种治理水体镉污染提供参考。

    • 实验所用90株浮萍材料来源于贵州大学生命科学学院浮萍种质资源库。实验处理前,采用Hoagland培养液(含1.5%蔗糖)对资源库保存的浮萍株系进行预培养[30]。培养条件为温度25 ℃、光暗比16 h∶8 h、湿度75%、光照强度为5 000 lx,培养时间为7 d。预培养后,挑选出生长状态良好的浮萍进行后续的实验处理。表1为初筛获得的7个优势浮萍株系材料的基本信息。

    • 试剂:CdCl2标准溶液(北京北方伟业,北京),巯基乙醇(Aladdin,上海),CTAB(Aladdin,上海),95%乙醇,浓硝酸,核酸提取液(Acmec,上海),异丙醇(Aladdin,上海),Taq酶(Trans Taq DNA Polymerase High Fidelity,北京),培养基组分参见Hoagland培养说明[30]

      仪器:人工气候培养箱(Thermo GXZ-80,美国),超净台(孚夏SW-CJ-1D,浙江),灭菌锅(ZEALWAY DR60DA;美国),pH 仪(雷磁pHS-3C,上海),离心机(平凡TGL-205,湖南),PCR仪(Thermo T100,美国),水平电泳仪(JUNYI JY1600C,北京),火焰原子分光光度计(Analytik Jena AG NovaAA 400P,德国),控温式远红外消煮炉(四平 LWY84B,吉林)。

    • 1)浮萍初筛。将90株浮萍在25 ℃、光暗比为16 h∶8 h、湿度75%、光照强度5 000 lx的条件下用30 mg·L−1 CdCl2处理7 d,以浮萍叶片颜色变化为筛选指标进行初筛,叶片颜色变化较小的浮萍为优势株系。

      2)浮萍复筛实验处理。将预培养得到的浮萍材料按相同质量接种至含有0.5 mg·L−1和10 mg·L−1CdCl2的1/5 Hoagland培养基进行培养,以不含镉的1/5Hoagland培养基为对照组。培养时间为7 d,7 d后收集样品进行后续分析。

      3)样品收集。7 d后,取各组培养液50 mL,以3 500 r·min−1离心10 min,取上清液置4 ℃冰箱待测;用流动的自来水、超纯水依次冲洗浮萍,滤纸吸干水分后记录鲜质量,于60 ℃烘箱中过夜烘干磨粉。称取0.1 g浮萍粉末于消解管中,加入2 mL浓硝酸过夜,再加入4 mL浓硝酸充分混匀,于280 ℃消解4 h。每次消解均设置空白对照,以消除此过程产生的误差。消解完毕后,用去离子水将消解管中剩余冷却至室温的消解液全部洗出,定容至50 mL待分析;称取0.5 g新鲜浮萍样品于15 mL离心管中,于−20 ℃冷冻1 h,加入 10 mL预热至50 ℃的乙醇(浓度为95%),充分混匀后暗置3 h,收集上清液用于测定叶绿素含量。

    • 1)分子生物学鉴定种属。CTAB法提取浮萍DNA[31],叶绿体 atpF-atpH间隔序列由引物atpF(5’-ACTCGCACACACTCCCTTTCC-3’)和引物atpH(5’-GCTTTTATGGAAGCTTAAACAAT-3’)扩增,rpS16内含子序列由引物rpS16F(5’-AAACGATGTGGTARAAAGCAAC-3’)和引物rpS16R(5’-AACATCWATTGCAASGATTCGATA-3’)扩增,PCR所用DNA聚合酶为高保真Taq酶,反应程序为:95 ℃预热5 min,94 ℃变性30 s,50 ℃退火30 s,72 ℃延伸45 s,30个循环。引物合成和测序由北京擎科公司完成。通过NCBI Blast比对和MegaX构建系统发育树鉴定浮萍株系的种属。

      2)相关指标的计算方法。植物生长速率根据式(1)计算;使用火焰原子分光光度计测定浮萍及培养液中重金属镉含量[26],再根据式(2)计算镉含量;浮萍对水体中镉的去除率根据式(3)计算;生物富集系数(bioconcentration factors,BCF)是植物组织与水环境中重金属的浓度比,反映了浮萍对重金属镉的富集能力,是常用的超富集植物评价指标[32],生物富集系数根据式(4)计算;叶绿素a含量和叶绿素b含量分别根据式(5)和式(6)计算。

      式中:${v}$为植株生长速率,g·d−1$\Delta m$为浮萍培养前后鲜质量变化,g;t为浮萍培养周期,d[33]

      式中:${w} $为单位重量样品中镉含量,mg·kg−1$ {{C}}_{{1}} $$ {{C}}_{{2}} $分别为样品消解液中镉含量和空白消解液镉质量浓度,mg·L−1$ {V} $为样品消解液总体积,mL;$ {m} $为消解时称取干粉总质量,g。

      式中:${{C}}_{{0}}$${{C}}_{{t}}$分别为初始镉质量浓度及处理结束后残留镉质量浓度,mg·L−1

      式中:${{R}}_{\text{BCF}}$为生物富集系数;${{C}}_{\text{p}}$为植物中镉的质量浓度,mg·kg−1${{C}}_{\text{w}}$为培养溶液中镉的质量浓度,mg·L−1

      式中:${{C}}_{\text{c}\text{h}\text{la}}$${{C}}_{\text{c}\text{h}\text{lb}}$分别为叶绿素a、叶绿素b的质量浓度,mg·L−1${{A}}_{\text{1}}$${{A}}_{\text{2}}$分别为叶绿素溶液在663 nm和645 nm处的吸光度,根据提取液中的叶绿素浓度,换算成每克鲜叶中叶绿素含量,mg·g−1

    • 采用$ \text{Excel} $$ \text{GraphPad Prism 6.0} $软件进行数据处理,采用Multiple t tests法进行分析比较。数据均为平均值±SD,重复3次。与对照组比较,*表示在$P \lt 0.05$水平下差异显著,**表示在$P \lt 0.01 $水平下差异显著。

    • 90个浮萍株系经过30 mg·L−1镉处理7 d后,有7个株系叶片颜色变化较小,仍然保持绿色,生长状况受镉影响较小。因此,初步确定以上7个浮萍株系为镉耐受优势株系,整体的浮萍株系耐受率为7.78%。图1为部分筛选结果,红色箭头所指的浮萍株系为经过镉处理前后叶片仍然保持绿色的株系,为初筛的优势株系。

    • 图2为PCR扩增的凝胶电泳图,atpF-atpH 间隔序列长度在 600~700 bp,rpS16内含子序列长度在1 000~1 100 bp。根据NCBI Blast比对(表2),确定了7个优化浮萍的种属,包括3个属4个种。7个浮萍中,1号株系为Spirodela polyrhiza,2号和3号株系为Lemna minor,4号和5号株系为Lemna japonica,6号和7号株系为Landoltia punctata。根据atpF-atpH 序列比对结果,最高相似性达到了99.70%,为4号株系;最低相似性达到了97.25%,为7号株系。根据rpS16序列比对结果,最高相似性达到了99.70%,为6号株系;最低相似性达到了94.80%,为4号和5号株系。7个浮萍株系与参考序列Blast比对整体相似性较高。

      根据atpF-atpH 间隔序列、rpS16序列和拼接序列通过Mega-X构建系统发育树(图3),1号株系与S. polyrhiza聚为一类;2号、3号株系与L. minor聚为一类;根据拼接序列系统发育树,4号、5号株系与L. japonica聚为一类;6号、7号株系与L. punctata聚为一类。系统发育树的聚类结果与Blast比对结果一致。

    • 图4可以看出,在低浓度镉处理后,7个浮萍株系均可正常生长。其中,2号和5号株系的平均生长速率甚至高于对照组。这可能与植物内生菌能促进植物生长和提高植物解毒能力有关[34-35]。在高浓度镉处理后,2号株系生长受到抑制,而其余6个浮萍株系仍能继续生长,但生长速率均降低。这与KHAN等[27]的研究结果一致,即0.5 mg·L−1是浮萍耐受镉的最大质量浓度,超过后浮萍生长会受到抑制。唐利萍等[26]的研究表明,浮萍的镉最适生长质量浓度为0~0.5 mg·L−1,在0.5~10 mg·L−1镉胁迫下造成的氧化损伤超过了浮萍自身解毒能力,导致浮萍的生长受到抑制,这也支持了本研究的结果。

    • 在低浓度镉处理7 d后,除了3号和6号株系,其他株系叶绿素a含量未出现明显下降。在高浓度镉处理7 d后,除7号株系外,其他株系叶绿素a含量均降低,其中3号株系下降最多,降低了97.70%(P<0.01)(图5(a)。在低浓度镉处理后,包括1号、4号和7号在内的3个株系叶绿素b含量未出现明显下降。在高浓度镉处理后,7个株系叶绿素b含量全部降低(图5(b))。在低浓度镉处理后,2号株系叶绿素a含量与叶绿素b含量的比值升高。在高浓度镉处理后,2号、4号、5号和7号株系叶绿素a含量与叶绿素b含量的比值升高,表明此4个株系叶绿素a降幅小于叶绿素b,叶绿素b含量受镉胁迫影响更大(图5(c))。在低浓度镉处理后,包括1号、4号和7号在内的3个株系总叶绿素含量未明显下降。在高浓度镉处理后,7个株系总叶绿素含量都呈现下降的趋势。3号株系与对照组相比总叶绿素含量下降最多,降低了96.99%(P<0.001)(图5(d))。

      镉对浮萍叶绿素含量的影响结果表明:在0.5 mg·L−1镉胁迫下,7个浮萍株系中叶绿素含量变化不大;在10 mg·L−1镉胁迫下,叶绿素含量随生长速率一同下降,表明0.5~10 mg·L−1镉不仅能抑制浮萍的生长,也能降低浮萍叶绿素含量。有研究[36]表明,镉作为非生物胁迫因素,能刺激植物产生氧化应激作用。随着镉浓度升高,植物体内积累的活性氧自由基不断增多,诱导膜脂质过氧化,从而破坏叶绿素膜结构,这可能是导致本研究高浓度镉处理后叶绿素含量下降的原因[37-38]。值得注意的是,在7个优势株系中,4号株系(L. japonica)和7号株系(L. punctata)浮萍在低浓度镉和高浓度镉胁迫下仍保持较高的叶绿素含量且较为稳定,在一定程度上能维持自身正常生理生化活动,有耐受镉胁迫的巨大潜力。

    • 图6 (a)所示,在低浓度镉处理7 d后,3号、4号、5号、6号和7号株系镉富集量均大于100 mg·kg−1,达到了镉超富集植物的标准[13];在高浓度镉处理后,7个株系的镉富集量均超过1 200 mg·kg−1,均远远超过超富集植物马缨丹(Lantana camara L.)的最大富集量(423 mg·kg−1)[39],也超过了水生超富集植物有翅星蕨(Microsorum pteropus)的最大富集量(1160.72 mg·kg−1)[40]。目前,已发表文献[26]中的植物最高镉富集量为2 544.5 mg·kg−1。本研究中的3号和4号株系分别可达3 259.55 mg·kg−1和2 834.30 mg·kg−1,均超过目前已知植物的最高镉富集量。

      生物富集系数是用来衡量植物富集能力的重要指标,也是鉴定超富集植物的标准之一[32]。一般来说,BCF大于1表明植物能从环境中吸收并富集重金属,可使环境中的重金属浓度低于植物体内重金属浓度[14,41]。由图6(b)可看出,7个浮萍株系在低浓度镉和高浓度镉处理后的BCF均大于50,远远高于超富集植物马缨丹(L. camara)[39]、多裂翅果菊(Pterocypsela laciniata)[42]和忍冬(Lonicera japonica Thunb)[43]的最大BCF(3.14、4.55和25.41)。其中,4号株系BCF变化不大,维持在200~300,在低浓度镉和高浓度镉胁迫下富集能力仍然保持稳定。综上所述,7个浮萍株系在高浓度镉处理后富集量大于100 mg·kg−1,表明浮萍是一种优良的镉超富集植物。此外,4号株系(L. japonica)受镉影响较小,在低浓度镉和高浓度镉胁迫下仍能维持较大的BCF,在镉污染水体修复方面具有更广泛的实际应用价值。

    • 图7可以看出,在低浓度镉处理后,4号株系对水体中镉的去除率最高,为75.00%;在高浓度镉处理后,7个浮萍株系对水体中镉的去除率均高于70%。其中,3号和4号株系对水体中镉的去除率分别为85.05%和82.50%,去除效果较好。在其他水生植物对水体中镉的去除研究中,茭白(Zinania latifolia Turcz.)在处理6 d后仅能去除水体中50%的镉[44],超富集植物有翅星蕨(M. pteropus)在10 mg·L−1镉处理7 d后对水体中镉的去除率为39.12%~53.99%[45]。在相同处理时长下,大叶珍珠草(Micranthemum umbrosum S.F Blake)对水体中镉的去除率最高为70.4%[46],低于本研究结果。在另一项有关浮萍去除镉的研究中,经3 mg·L−1镉处理同样时长,浮萍对水体中镉的去除率最高为72.43%[26],低于本研究中10 mg·L−1镉处理后7个株系对水体中镉的去除率。以上结果说明,在相同处理条件或处理时长下,浮萍与其他水生植物相比,镉耐受和富集能力更为突出[29],表明浮萍是一种可用于去除水体重金属镉污染且效果良好的水生植物。在国内外的研究中,浮萍中的绿萍属(Lemna)和少根紫萍属(Landoltia)对水体中镉的最高去除率均在70%以上[27,40]。本实验中的7个浮萍株系在高浓度镉胁迫后对水体中镉的去除率也保持在了70%以上,3号和4号株系对水体中镉的去除率分别达到了85.05%和82.50%,最高富集量和最大BCF分别为3 259.55 mg·kg−1和727.05。这表明初筛、品种鉴定和复筛的筛选系统与普通的少数品种筛选相比具有明显的优势。

      目前国内外关于L. japonica的研究较少,有关其在水体重金属富集与去除方面的研究更是鲜有报道。4号和5号株系作为L. japonica,在高浓度镉胁迫下,镉富集量分别为2 834.30 mg·kg−1和2 226.06 mg·kg−1,对水体中镉的去除率分别达到了82.50%和81.00%,具有优良的镉耐受和富集效果,为L. japonica在应用于重金属污染水体修复方面提供了基础。在本研究中,4号株系 (L. japonica)在镉胁迫下不仅能维持自身正常生长,还拥有优良的镉富集能力,在去除水体镉方面效果显著,是本研究筛选出的最优株系。

    • 1)经过0.5 mg·L−1镉处理7 d后,3号、4号、5号、6号和7号5个浮萍株系的镉富集量均大于100 mg·kg−1,生物富集系数均超过50;在10 mg·L−1镉处理7 d后,7个株系的镉富集量均超过1 200 mg·kg−1,对水体中镉的去除率均高于70%。上述结果表明浮萍是一种镉超富集植物。

      2)在经10 mg·L−1镉处理后,L. japonica品种的镉富集量超过了2 200 mg·kg−1,对水体中镉的去除率超过了80.00%,表明其具有优良的镉耐受和富集特性。

      3)4号株系在经过0.5 mg·L−1和10 mg·L−1镉处理后,其生物富集系数分别为226.15和283.43,对水体中镉的去除率分别为75.00%和82.50%;在10 mg·L−1镉胁迫后,镉富集量达2 834.30 mg·kg−1,是本研究筛选出的用于修复水体镉污染的最优株系。

    参考文献 (46)

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